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文心兰无菌播种与快速繁殖

2015-10-21 09:59:37 | 来源: 2019中国北京世界园艺博览会官网 | 作者: 张莹 田敏 陈胜 | 责任编辑: 吕欣

 文心兰花朵数量繁多,有芳香气味,极具观赏价值。多附生于海拔1200~1800m的山地疏林中树干上,墨西哥和美国中部是其主要分布中心。文心兰的种子小,无胚乳,自然条件下萌发率极低,人工栽培中虽然可用分株繁殖,但一年仅可繁殖1~2个芽,繁殖系数较低。本试验采用文心兰成熟种子接种于培养基上进行无菌培养获得较好的效果,对其种质资源的保护和利用具有一定的应用价值。

材料与方法

植物名称:迷你芳香型文心兰。

材料类别:人工自花授粉后的成熟种子。

培养条件:无菌播种培养基:(1)MS;(2)1/2MS;(3)N6;(4)VW(Vacin-Went培养基)。分化成苗培养基:(5)MS+6-BA1.0mg/L+IAA0.2(单位下同)。生根壮苗培养基:(6)MS+6-BA0.1+NAA0.5+活性炭0.5g/L。上述培养基中均添加20g/L蔗糖和7.0g/L

卡拉胶,pH值5.6~5.8。培养温度为(25±2)℃,光照强度为40μmol/m2/s,光照时间为12小时/天。

生长与分化

无菌材料的获得:取文心兰植株自交授粉后的成熟果荚,用洗衣粉溶液浸泡5分钟,然后在自来水下冲洗20分钟。在超净工作台上,去除果柄,将蒴果置于75%乙醇溶液中浸泡8分钟,然后用0.1%升汞溶液消毒3分钟,最后用无菌水冲洗4~6次。将洗净的蒴果置于灭菌滤纸上吸干水分,用无菌解剖刀将蒴果的前后两端各1cm处切下,中间段纵向切开,将蒴果内干燥的粉末状的种子均匀撒在培养基(1)~(4)上。

种子萌发:在暗培养条件下培养约10天后转入光照条件下培养,约15天后大部分种胚膨大,少量种胚开始长成顶端有绿色叶原基,球体基部有丝状毛的原球茎,35天后原球茎基本全部形成。种子在培养基(1)~(3)上的萌发速度大致相同,萌发率均在90%以上。

分化成苗:在光照条件下,原球茎生长阶段比较短暂,极易分化。将上一阶段获得的原球茎及小芽的混合体转接到培养基(5)上,原球茎逐渐分化成苗,随着培养时间的延长,小苗基部或长出新芽或形成新的原球茎,约20天后小苗可长出2~3片叶子。

壮苗及生根培养:待丛生芽生长至约2~3cm时,转接到培养基(6)上进行不定根的诱导,培养约15天后,可长出2~4条不定根,形成完整植株。30天后根长可达1~3cm,且根系粗壮,植株生长健壮,叶片浓绿,生根率在90%左右。

炼苗移栽:生根培养50天后,打开瓶盖,置于温室中,炼苗2~4天后,从培养瓶中取出组培苗,洗净根部的培养基,在1000倍液 多菌灵溶液中浸泡1分钟,然后用水苔包裹小苗基部移栽入穴盘中,保持环境温度20℃~25℃,空气湿度70%以上,成活率可达85%。